Video: IARASI AM LUAT TEAPA ONLINE 2025
PCR reprezintă o reacție în lanț a polimerazei, o tehnică de biologie moleculară pentru amplificarea segmentelor de ADN, prin generarea de copii multiple utilizând enzime ADN polimerază în condiții controlate. La fel de putin ca o singura copie a unui segment de ADN sau a unei gene poate fi clonata in milioane de exemplare, permitand detectarea folosind coloranti si alte tehnici de vizualizare.
Dezvoltat în 1983, procesul PCR a făcut posibilă efectuarea secvențierii ADN și identificarea ordinii nucleotidelor în genele individuale. Metoda utilizează ciclul termic sau încălzirea și răcirea repetată a reacției pentru topirea și replicarea ADN-ului. Pe măsură ce PCR continuă, ADN-ul "nou" este utilizat ca șablon pentru replicare și se produce o reacție în lanț, amplificând exponențial șablonul ADN.
Tehnicile PCR sunt aplicate în multe domenii ale biotehnologiei, inclusiv ingineria proteinelor, clonarea, criminalistica (testarea amprentelor ADN), testarea paternității, diagnosticul bolilor ereditare și / sau infecțioase și analiza probelor de mediu.
În special în domeniul criminalistic, PCR este util mai ales pentru că amplifică chiar și cea mai mică cantitate de probe ADN. PCR poate fi, de asemenea, utilizat pentru a analiza ADN-ul care are mii de ani și aceste tehnici au fost folosite pentru a identifica totul de la un mamut de 800.000 de ani la mumii din întreaga lume.
Procedura PCR este după cum urmează:
- Inițializarea: Această etapă este necesară numai pentru ADN polimerazele care necesită PCR de pornire la cald. Reacția este încălzită între 94 și 96 ° C și menținută timp de 1-9 minute.
- denaturarea: Dacă procedura nu necesită inițializare, denaturarea este primul pas. Reacția este încălzită la 94-98 ° C timp de 20-30 secunde. Legăturile de hidrogen ale șablonului ADN sunt perturbate și se creează molecule de ADN monocatenare.
- Recoacerea: Temperatura de reacție este mai mică între 50 și 65 ° C și menținută timp de 20-40 secunde. Primerii se aseamănă cu șablonul de ADN monocatenar. Temperatura este extrem de importantă în timpul acestei etape. Dacă este prea fierbinte, grundul ar putea să nu se lege. Dacă este prea rece, grundul se poate lega imperfect. O bună legătură este formată atunci când secvența de primer corespunde strâns secvenței șablonului.
- Extensie / Alungirea: Temperatura în timpul acestei etape variază în funcție de tipul de polimerază. ADN polimeraza sintetizează o nouă componentă ADN.
- Alungirea finală: Această etapă se realizează la 70-74 ° C timp de 5-15 minute după ciclul PCR final.
- Închidere finală: Acest pas este opțional. Temperatura este menținută la 4-15 ° C și suprimă reacția.
Procedura este împărțită în trei etape:
- Exponențiale de amplificare: În timpul fiecărui ciclu, produsul (piesa specifică de ADN care este reprodusă) este dublată.
- Leveling-off stage: Deoarece ADN polimeraza pierde activitatea și consumă reactivi, reacția încetinește.
- Platou: Nu se mai acumulează niciun produs.
Când un angajator vă poate trage prin telefon sau prin e-mail
Poți fi concediat prin telefon sau e-mail? Iată informații despre momentul și modul în care angajatorii vă pot încheia și cum să vă ocupați de faptul că ați fost concediat de la locul de muncă.
Cum reacționează lanțurile de polimerază pentru a amplifica genele
Aflați teoria de bază din spatele reacției în lanț a polimerazei și etapele din tehnica PCR pentru a face mai multe copii ale unei gene dintr-o mostră de ADN.
Cum să contactați Serviciul Clienți PCH prin telefon, prin e-mail
Aflați cum să contactați serviciul clienți PCH pentru a vă dezabona de la e-mailuri, pentru a vă verifica câștigul sau pentru a returna o comandă.